【摘 要】
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目的 研究缺氧微环境对人源雄激素非依赖性前列腺癌细胞系PC3和人源雄激素依赖性前列腺癌细胞系LNCaP恶性生长的影响. 方法 两种前列腺癌细胞分别进行常氧和缺氧培养,常氧组
【机 构】
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北京协和医学院研究生院,北京100730;国家卫生健康委科学技术研究所,北京 100081;国家卫生健康委科学技术研究所,北京 100081;首都医科大学附属北京朝阳医院,北京100020;北京协和医
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目的 研究缺氧微环境对人源雄激素非依赖性前列腺癌细胞系PC3和人源雄激素依赖性前列腺癌细胞系LNCaP恶性生长的影响. 方法 两种前列腺癌细胞分别进行常氧和缺氧培养,常氧组培养条件为21％O2、5％CO2和74％N2,缺氧组培养条件为1％O2、5％ CO2和94％N2.使用细胞增殖检测试剂盒(CCK-8)检测培养不同时间点两种癌细胞的增殖情况;采用实时荧光定量PCR (qRT-PCR)和蛋白印迹(Western blotting)方法检测癌细胞上皮标志物E钙粘蛋白(E-cadherin)和间充质标志物波形蛋白(Vimentin) mRNA和蛋白表达水平的变化;通过细胞划痕实验和Transwell实验检测癌细胞的转移和侵袭能力. 结果 短时间缺氧状态下两种细胞增殖活性均显著增强,与其他时间组比较,PC3和LNCaP分别在4h和16 h时相对常氧状态增殖活性最高(P＜0.05);但长时间缺氧后,两种细胞增殖活性均下降,分别在20 h和72 h时达到最低(P＜0.05).qRT-PCR和Western blotting结果显示,两种前列腺癌细胞中,不同缺氧时间组E-cadherin的mRNA和蛋白表达水平均显著低于常氧组(P＜0.05),并且随缺氧时间的增加总体上呈现逐渐降低的趋势;各缺氧组Vimentin的mRNA和蛋白表达水平均显著高于常氧组(P＜0.05),并且随缺氧时间的增加总体上呈现逐渐升高的趋势,呈现出典型的上皮间充质表型转化.细胞划痕和Transwell实验结果显示,在不同缺氧阶段,与常氧组比较,两种前列腺癌细胞的细胞迁移率和侵袭能力均显著增高(P＜0.01). 结论 缺氧促进前列腺癌的恶性生长是一个动态变化的过程,缺氧可以促进前列腺癌细胞的恶性增殖与迁移.
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