【摘 要】
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目的:探讨6-轻基多巴胺氢溴酸盐(6-hydroxydopamine,6-OHDA)诱导帕金森病(parkinson\'s disease,PD)模型小鼠多巴胺能神经元坏死性凋亡的细胞机制.方法:将含0.02％抗坏血酸和0.9％生理盐水的6-OHDA注入开颅后的8周龄、健康雄性C57/BL小鼠的单侧黑质(substantia nigra,SN)区域构建PD小鼠模型(模型组),用APO旋尾实验和旷场实验验证PD小鼠模型的构建情况;取模型组小鼠脑组织进行免疫组化(immunohistochemistry,
【机 构】
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佛山市第一人民医院神经内科,广东佛山 528200;佛山市第一人民医院血管及介入神经外科,广东 佛山 528200
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目的:探讨6-轻基多巴胺氢溴酸盐(6-hydroxydopamine,6-OHDA)诱导帕金森病(parkinson\'s disease,PD)模型小鼠多巴胺能神经元坏死性凋亡的细胞机制.方法:将含0.02％抗坏血酸和0.9％生理盐水的6-OHDA注入开颅后的8周龄、健康雄性C57/BL小鼠的单侧黑质(substantia nigra,SN)区域构建PD小鼠模型(模型组),用APO旋尾实验和旷场实验验证PD小鼠模型的构建情况;取模型组小鼠脑组织进行免疫组化(immunohistochemistry,IHC)检测多巴胺能神经元(dopaminergic neurones,DA)标记物酪氨酸经化酶(tyrosine hydroxylase,TH)恢复水平;通过qPCR和IHC检测模型组小鼠坏死性凋亡相关基因(FADD,RIPK1,TRADD)mRNA和蛋白表达水平.以左脑黑质区域只注入含0.02％抗坏血酸的0.9％生理盐水的小鼠作为正常对照组(假手术组).结果:与对照组比较,6-OHDA组小鼠的旋转次数明显增加,跑动距离和平均速度明显减少(P＜0.05),静止时间则明显增加(P＜0.05);6-OHDA组小鼠纹状体区域(STR)和黑质区域(SN)的TH阳性表达均明显降低(P＜0.01),其中STR中的致密神经树突纤维明显减少,SN中的DA神经元大量丢失,仅可见少量多巴胺能神经元细胞存留,残留的阳性神经元细胞胞体小,突起短;6-OHDA组小鼠RIPK1、FADD的基因和蛋白表达水平均明显增加.结论:6-OHDA可促进DA能神经元变性死亡,其可能机制是通过促进FADD-RIPK1坏死性凋亡信号通路.
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