【摘 要】
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PCR方法扩增人基质金属蛋白酶-2(MMP-2)不含信号肽的表达序列,酶切和测序鉴定正确后,构建酵母重组表达质粒pPIC9/MMP-2,电击法转化毕赤酵母(Pichia pastoris)细胞得到阳性克
【基金项目】
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国家重大基础研究发展计划项目 ( 973项目 ;G19980 5 110 5 )~~
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PCR方法扩增人基质金属蛋白酶-2(MMP-2)不含信号肽的表达序列,酶切和测序鉴定正确后,构建酵母重组表达质粒pPIC9/MMP-2,电击法转化毕赤酵母(Pichia pastoris)细胞得到阳性克隆,甲醇诱导获得含大量基质金属蛋白酶-2的培养上清,经Sephacryl S-200纯化后,纯度达到电泳纯.明胶酶谱和SDS-PAGE分析说明重组MMP-2能够降解明胶和Ⅳ型胶原,表明重组蛋白具有与天然MMP-2相似的底物特异性.糖基化分析和SDS-PAGE表明,表达产物的分子量约为50kD,重组MMP-2
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