磷脂酶酶活力测定条件的优化

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采用无油磷脂为底物,酸碱滴定法测定磷脂酶LecitaseUltra的酶活力,在单因素试验的基础上,选定反应时问、反应温度、反应pH值进行响应面分析试验,建立磷脂酶酶活力的二次回归方程,通过响应面分析得到酶活力测定的优化组合条件。结果表明:反应时间、反应温度、反应pH值对酶活力都有极其显著影响,测定酶活力的最佳条件为:底物质量浓度4g/100mL、终点pH9.0、酶液稀释倍数100倍、反应pH5.1、反应温度53℃、反应时间8min,得到磷脂酶的酶活力为9550U/g。
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