【摘 要】
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目的 利用噬菌体表面展示技术筛选人肝再生增强因子(hALR)相互作用蛋白并初步鉴定噬菌体展示肽的生物学活性.方法以hALR为靶蛋白,采用T7噬菌体表面展示技术从人肝癌细胞cDNA表达文库筛选与hALR相互作用的特异噬菌体克隆;对获得的特异噬菌体克隆cDNA插入片段进行测序及生物信息学分析;利用3HTdR掺入法测定噬菌体展示肽及联合hALR对QGY肝癌细胞的增殖效应.结果经过四轮生物淘洗,特异噬菌体
【机 构】
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400010,重庆医科大学病毒性肝炎研究所、教育部感染性疾病分子生物学重点实验室,四川省人民医院传染科,400010,重庆医科大学病毒性肝炎研究所、教育部感染性疾病分子生物学重点实验室,400010,
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目的 利用噬菌体表面展示技术筛选人肝再生增强因子(hALR)相互作用蛋白并初步鉴定噬菌体展示肽的生物学活性.方法以hALR为靶蛋白,采用T7噬菌体表面展示技术从人肝癌细胞cDNA表达文库筛选与hALR相互作用的特异噬菌体克隆;对获得的特异噬菌体克隆cDNA插入片段进行测序及生物信息学分析;利用3HTdR掺入法测定噬菌体展示肽及联合hALR对QGY肝癌细胞的增殖效应.结果经过四轮生物淘洗,特异噬菌体克隆富集,获得212 bp的噬菌体cDNA插入序列,生物信息学分析与人Citron激酶同源性达100%;该噬菌体展示肽及联合应用hALR对QGY细胞具有促增殖效应.结论利用噬菌体表面展示技术可以筛选出与hALR具有相互作用的多肽,该序列与人Citron激酶完全同源,Citron激酶可能参与了hALR促肝癌细胞增殖的过程。
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