应用酵母双杂交技术筛选与乙型肝炎病毒e抗原结合蛋白2结合的肝细胞蛋白编码基因

• 作 者: 梁赟磊 成军 邢卉春 王琦 李越 张斌 樊万虎 袁菊 张黎颖
• 机 构: 山西医科大学附属第一医院感染病科,北京地坛医院传染病研究所,山西医科大学附属第一医院肝病四科
• 出 处: 解放军医学杂志
• 发表日期: 2008年7期
• 关键词: 肝炎病毒 乙型 HBEBP2 双杂交系统技术 蛋白质相互作用 hepatitis B virus HBEBP＇2 two-hybrid system te
• 基金项目: “973”国家重点基础研究发展计划资助项目（2004CB518908）

目的构建乙型肝炎病毒e抗原结合蛋白2（HBEBP2）的真核表达载体并筛选人肝细胞中与HBEBP2相互作用的基因。方法通过PCR扩增获得HBEBP2基因,构建真核表达载体pGBKT7-HBEBP2,转化酵母菌AH109并在其中进行表达。随后与预转化了人肝细胞文库质粒pACT2的酵母细胞Y187进行配合,在营养缺陷型培养基（SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade）和铺有X-α-gal的营养缺陷型培养基（SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade）上进行双重筛选获得阳性克隆。提取文库质粒pACT2-DN