二化螟钙黏蛋白CAD1的原核表达及与Cry1Ac、Cry2Aa蛋白的结合

• 作 者: 周浩 李博 牛林 邱林 王永
• 机 构: 湖北工程学院生命科学技术学院/特色果蔬质量安全控制湖北省重点实验,华中农业大学植物科学技术学院/昆虫资源利用与害虫可持续治理湖北省重点实验室,广州海关隶属南沙海关,中国农业科学院棉花研究所/棉花生物学
• 出 处: 生物安全学报
• 发表日期: 2018年4期
• 关键词: 二化螟 钙黏蛋白 原核表达 蛋白结合 Chilo suppressalis cadherin prokaryotic expression protein bi
• 基金项目: 湖北省教育厅科研项目(Q20162707).

【目的】二化螟是水稻的重要害虫之一,钙黏蛋白(cadherin,CAD)是一类重要的Bt杀虫蛋白受体,在获得二化螟钙黏蛋白基因(CsCAD1)的基础上,明确CsCAD1蛋白与Cry1Ac和Cry2Aa蛋白的结合能力。【方法】利用PCR技术克隆CsCAD1基因片段,将构建的pET-28a-(+)-CsCAD1重组质粒转入原核表达菌株BL21(DE3)中,IPTG诱导表达。目的蛋白经Ni柱亲和纯化后SDS-PAGE电泳检测,利用western blot和ligand blot技术分析其与Cry1Ac和Cry2