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以亲和层析提取的肾综合征出血热(HFRS)病毒结构蛋白为特异性抗原.建立了检测HFRS病人血清中特异性抗体的ELISA间接法。在此基础上.用正交设计法及方阵法对影响ELISA接法特异性的主要因素(封闭因素、包被时间、抗原保存时间、血清浓度及抗原浓度)进行探讨。结果表明,封闭因素及抗原保存时间对ELISA反应的特异性没有显著性影响;抗原包被时间在24h结果最佳;最适抗原浓度及血清浓度分别为25μg/ml及1:8000。