【摘 要】
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目的：体外原核表达小鼠Foxp3蛋白,并以其免疫家兔,制备多克隆抗体。方法：从质粒Foxp3-pMD-18T扩增小鼠Foxp3全长基因,亚克隆至原核表达载体pET-32 a,转化E.coliBL-21;IPTG诱导
【机 构】
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江苏大学基础医学与医学技术学院,无锡市妇幼保健院
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（30610103127）,江苏大学高级人才基金资助项目（05JDG042）,江苏大学“拔尖人才工程”资助项目
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目的：体外原核表达小鼠Foxp3蛋白,并以其免疫家兔,制备多克隆抗体。方法：从质粒Foxp3-pMD-18T扩增小鼠Foxp3全长基因,亚克隆至原核表达载体pET-32 a,转化E.coliBL-21;IPTG诱导表达目的蛋白,Ni^2＋-NTA柱纯化及蛋白质印迹鉴定蛋白;纯化蛋白免疫家兔,制备多克隆抗体,ELISA法检测抗体效价,蛋白质印迹检测抗体特异性。结果：成功构建了Foxp3-pET-32 a原核表达载体,表达和纯化了目的蛋白;ELISA法检测抗体效价为1∶20 000,蛋白质印迹检测结果显示抗体
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