【摘 要】
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为了研究狂犬病病毒（rabies virus,RV）糖蛋白（rgp）膜外区在以糖蛋白为免疫原的免疫应答中的作用,提取RV的RNA,通过RT-PCR扩增RV糖蛋白膜外区1375 bp的序列,将其克隆入pMD18-T载体
【机 构】
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华南农业大学,中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所,中国科学院广州生物医药与健康研究院
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（30901067）, 高等学校博士学科点专项科研基金（20094404120016）, 广东省科技计划项目（2009B020307011）, 广东省自然科学基金（10451064201005443）, 广东省高等学校自然科学基金（9451064201003715）, 畜疫病病原生物学国家重点实验室（SKLVEB2009KFKT014,SKLVEB2010KFKT010）
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为了研究狂犬病病毒（rabies virus,RV）糖蛋白（rgp）膜外区在以糖蛋白为免疫原的免疫应答中的作用,提取RV的RNA,通过RT-PCR扩增RV糖蛋白膜外区1375 bp的序列,将其克隆入pMD18-T载体中,经测序比对正确后,通过酶切将其亚克隆入pVAX1表达载体的多克隆酶切位点处,将酶切鉴定正确的阳性重组子命名为pVAX-rgp,构建表达狂犬病病毒糖蛋白膜外区的真核表达载体,在质脂体介导下转染DK细胞观察其表达情况。研究结果表明,经免疫荧光和Western blotting鉴定,有特异性荧光
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