高分辨熔解技术在疾病关联SNP验证检测中的应用。

• 机 构: 兰州大学第二医院中心实验室
• 出 处: 现代检验医学杂志
• 发表日期: 2012年2期
• 关键词: 高分辨熔解 单核苷酸多态性(SNP) 基因分型 荧光染料 high resolution melting single nucleotide polymor

摘要：目的探讨高分辨熔解（high resolution melting，HRM）技术的常规化检测流程以及实验设计策略和具体操作要点。方法以疾病关联SNP单位点IL1B-31和双位点IL6-597／-572的检测为例，分别从核酸提取，引物设计、验证和有效性评价以及酶系统和HRM染料的选择与匹配等方面进行最优策略与流程的探索。结果成功建立了单位点IL1B-31和双位点IL6-597／-572的PCR—HRM检测方法并得到验证。柱提基因组DNA模板、特异高效HRM引物和应用热启动酶是PCRIIRM检测方法成功