【摘 要】
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目的 比较研究聚肌胞苷酸(Poly I∶C)对裸鼹鼠和小鼠巨噬细胞双链RNA依赖性蛋白激酶R(PKR)/真核细胞翻译起始因子2α(EIF2α)信号通路的影响.方法 分别提取裸鼹鼠和C57BL/6J
【机 构】
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海军军医大学基础医学院实验动物学教研室,上海,200433
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目的 比较研究聚肌胞苷酸(Poly I∶C)对裸鼹鼠和小鼠巨噬细胞双链RNA依赖性蛋白激酶R(PKR)/真核细胞翻译起始因子2α(EIF2α)信号通路的影响.方法 分别提取裸鼹鼠和C57BL/6J小鼠巨噬细胞,随机分成对照组、Poly I∶C给药组、2-氨基嘌呤(2-AP)给药组、Poly I∶C+2-AP给药组.给药后,蛋白印迹检测细胞中磷酸化PKR(Pho-PKR)、PKR、磷酸化EIF2α(Pho-EIF2α)、EIF2α、Caspase-8蛋白的表达情况.结果 Poly I∶C给药后,小鼠巨噬细胞的PKR和eIF2α磷酸化水平显著降低(P＜0.01),而裸鼹鼠相反则显著升高(P＜0.01),表明Poly I:C能抑制小鼠的PKR活性,而裸鼹鼠的PKR活性被显著激活;Poly I∶C干预的基础上通过2-AP抑制PKR活性,结果显示,2-AP给药后下调了小鼠和裸鼹鼠PKR和磷酸化PKR的表达(P＜.01),尤其是裸鼹鼠的PKR,2-AP给药后显著地抑制裸鼹鼠PKR的表达;单独2-AP给药后小鼠巨噬细胞的活性PKR和活性eIF2 α比例显著下降(P＜0.01),裸鼹鼠巨噬细胞的活性PKR比例也显著下降(P＜0.01);通过2-AP抑制PKR活性后,裸鼹鼠细胞的Caspase-8蛋白表达水平显著下降,但小鼠细胞的表达却无显著差异.结论 与小鼠比较,裸鼹鼠细胞对Poly I∶C刺激具有较高的抗性;细胞的PKR对2-AP的敏感性更强;PKR活性对Caspase-8表达有促进作用.
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