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目的
探讨γδT细胞对耐甲氨蝶呤(MTX)骨肉瘤(OS)细胞的杀伤作用。
方法以MTX为诱导剂，采用逐步增加药物剂量冲击诱导方法，诱导建立人耐MTX OS细胞株U2OS/MTX细胞。使用唑来膦酸(ZOL)联合IL-2体外扩增人γδT细胞，乳酸脱氢酶释放法(LDH)检测γδT细胞对U2OS/MTX细胞株的杀伤活性，流式细胞技术检测γδT细胞表面CD69的表达，酶联免疫吸附试验(ELISA)检测γδT细胞IFN-γ的分泌。
结果健康人外周血单个核细胞(PBMC)来源的γδT细胞具有杀伤U2OS/MTX耐药细胞株的能力。经过ZOL(1 μmol/L) 24 h预处理U2OS/MTX耐药细胞株，γδT细胞杀伤U2OS/MTX耐药细胞株的能力显著增加(P<0.01)。U2OS和U2OS/MTX耐药细胞株均能提高γδT细胞表面CD69的表达和IFN-γ的分泌(P<0.05)；ZOL(1 μmol/L) 24 h预处理U2OS/MTX耐药细胞株后可显著增强γδT细胞表面CD69的表达和IFN-γ的分泌(P<0.01)。
结论γδT细胞对人OS细胞株U2OS/MTX具有杀伤作用，ZOL能增强γδT细胞对人OS细胞株U2OS/MTX的杀伤作用。