目的 观察阿司匹林对原代培养大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞(AEC Ⅱ)的保护效应,并探讨其抗氧化损伤的机制.方法 将原代分离、纯化、培养的离体大鼠AEC Ⅱ分为5组.过氧化氢损伤(H2O2)组在培养40 h后加入0.5 mmol/L H2O2,建立细胞氧化损伤模型;生理盐水(NS)组则加入NS ;阿司匹林预处理1、2、3(A1～3)组在加入H2O2前给予阿司匹林50、100、200μmol/L预处理.3 h后观察细胞形态学变化和贴壁细胞计数;采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞存活率;采用免疫组化法和聚合酶链反应法检测NS组、A1～3组在培养20、40、60 h AEC Ⅱ中血红素氧合酶-1(HO-1)的蛋白及mRNA表达.结果 采用胰蛋白酶消化、免疫黏附法每只鼠可收获(2.0～2.5)×107个AEC Ⅱ,纯度和活性均＞90%.与NS组比较,H2O2组细胞间隙增宽,贴壁细胞数减少,细胞皱缩,细胞存活率(A值)明显下降(0.054 6±0.004 0比0.103 8±0.009 9,P＜0.01);与H2O2组比较,A1～3组贴壁细胞数增多,细胞形态较完整,无明显皱缩,细胞存活率(A值)明显增加(0.066 9±0.003 9、0.071 0±0.006 5、0.078 7±0.009 2比0.054 6±0.004 0,均P＜0.01).与NS组比较,A1～3组培养20、40、60 h时HO-1的蛋白及mRNA表达均明显增加,60 h时达峰值[蛋白(积分A值):1.59±0.12、1.60±0.09、1.61±0.08比1.25±0.11;mRNA(Ct值比值):24.31±1.74、30.45±2.53、32.63±3.74比22.99±1.95,均P＜0.05];但A1～3组间HO-1蛋白表达无明显差异.结论 阿司匹林通过上调HO-1表达对离体培养氧化损伤的大鼠AEC Ⅱ起保护效应;HO-1可能是其中重要的保护调节因子。
阿司匹林预处理对原代培养大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞抗氧化损伤的影响研究
【摘 要】
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目的 观察阿司匹林对原代培养大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞(AEC Ⅱ)的保护效应,并探讨其抗氧化损伤的机制.方法 将原代分离、纯化、培养的离体大鼠AEC Ⅱ分为5组.过氧化氢损伤(H2O2)组在培养40 h后加入0.5 mmol/L H2O2,建立细胞氧化损伤模型;生理盐水(NS)组则加入NS ;阿司匹林预处理1、2、3(A1～3)组在加入H2O2前给予阿司匹林50、100、200μmol/L预处理.3
【机 构】
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563003,贵州,遵义医学院附属医院重症医学科,563003,贵州,遵义医学院附属医院重症医学科,山东省微山县人民医院麻醉科,563003,贵州,遵义医学院附属医院重症医学科,563003,贵州,遵
【出 处】
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中华危重病急救医学
【发表日期】
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2011年23期
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