【摘 要】
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目的:观察高磷刺激大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)后表型转化相关基因的动态变化,探讨VSMCs的表型转化方向.方法:组织块贴壁法原代培养大鼠胸主动脉VSMCs,经形态学和免疫细胞化学
【机 构】
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河北医科大学第四医院肾内科 石家庄,050011
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目的:观察高磷刺激大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)后表型转化相关基因的动态变化,探讨VSMCs的表型转化方向.方法:组织块贴壁法原代培养大鼠胸主动脉VSMCs,经形态学和免疫细胞化学鉴定后,将其随机分为空白对照组和β-甘油磷酸组,RT-PCR法同管扩增检测VSMCs核心结合因子α1(Cbfα1)、性别决定区Y-box 9(Sox9)、Ⅱ型胶原a1(ColⅡa1)及Ⅹ型胶原a1(Col Ⅹ a1)mRNA在不同时间点的动态表达情况.结果:随着高磷刺激时间的延长,Cbfα1 mRNA的表达呈先上升,后下降,之后再次升高的趋势(P＜0.05),即呈“峰-谷-峰”样;而Sox9则表现为“单峰”(P＜0.05),且其达峰时间处于Cbfα1的谷值和第2峰值之间.作为Sox9下游基因的ColⅡa1的变化与之类似,而Col Ⅹ a1则在初期维持基础的低水平,而在Cbfα1第2次出现峰值后表达显著升高(P＜0.05).结论:高磷刺激后Cbfα1和Sox9及其下游Ⅱ型和Ⅹ型胶原mRNA的动态变化符合软骨细胞分化的特点,进而推测VSMCs类似于成骨/软骨前体细胞、增生软骨细胞、肥厚软骨细胞的分化过程可能参与了β-甘油磷酸诱导的表型转化.
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