塔希纳病毒的重组酶介导扩增快速检测方法

• 作 者: 李樊 郭晓芳 殷启凯 申辛欣 付士红 许松涛 雷雯雯 周红宁 马学军 王环宇
• 机 构: 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所虫媒室,卫生健康委生物安全重点实验室,北京102206“,”中国疾病预防控制中心传染病预防控制国家重点实验室,北京102206“,”云南省寄生虫病防治所,云南普洱,
• 出 处: 疾病监测
• 发表日期: 2020年3期
• 关键词: 塔希纳病毒 检测 核酸 重组酶介导扩增

目的 采用反转录重组酶介导核酸扩增(RT-RAA)方法建立塔希纳病毒(TAHV)检测方法.方法 在TAHV S节段保守区设计引物和探针.用构建含检测目的基因片段的质粒和病毒细胞培养物对TAHV的RT-RAA检测方法的灵敏性进行评价,通过检测黄病毒属、甲病毒属、正布尼亚病毒属和东南亚十二节段病毒属共7种病毒验证方法的特异性.并选用2018年采集自宁夏回族自治区的30批次蚊虫样本来评价该检测方法.结果 该方法对构建的质粒标准品的检测下线为100拷贝/反应,病毒培养物最低检出限为10空斑形成单位/反应,与其他7种虫媒病毒无交叉反应.在检测蚊虫样本时,该方法与实时定量PCR方法检测结果的一致性为100％.结论 建立了快速、特异以及灵敏的TAHV的RT-RAA检测方法,并适用于标本中TAHV核酸的现场检测.