目的 观察氟中毒大鼠成骨细胞Wnt3α、β-链蛋白（catenin）mRNA和蛋白表达，探讨氟骨症发生与Wnt通路的关系。方法健康SD大鼠36只，体质量100—120g，按体质量将大鼠随机分为3组，每组12只。对照组大鼠饮用自来水（含氟量〈1mg／L），低氟组、高氟组大鼠分别饮用含5、50mg／L氟化钠的自来水。大鼠饲养8个月，建立慢性氟中毒模型。饲养期间检查大鼠氟斑牙发生情况，股动脉放血处死大鼠前收集大鼠24h尿样，处死后取股骨组织。采用氟离子选择电极法测定尿氟和骨氟含量；固相夹心酶联免疫吸附（ELISA）法测定血清骨碱性磷酸酶（BALP）和抗酒石酸酸性磷酸酶一5b（TRACP一5b）含量；光镜下观察骨组织的形态学变化，测量骨皮质厚度、骨小梁宽度及密度变化；原位杂交技术和免疫组化方法检测成骨细胞Wnt3α、β-cateninmRNA和蛋白表达。结果大鼠氟斑牙检出率低氟组为66．7％（8／12），高氟组为91．7％（11／12），对照组为0．O％（0／12），组间比较差异有统计学意义（x。：21．6，P〈0．05）。尿氟和骨氟组问比较差异有统计学意义（F=36．57、467．02，P均〈0．05），其中低氟组[（2．06±0．64）mg／L、（632．33±123．21）mg／kS]和高氟组[（7．69±1．96）mg／L、（1088．75±156．16）mg／kg]高于对照组[（1．26±0．17）mg／L、（305．58±91．26）mg／kg，P均〈0．05]，高氟组高于低氟组（P均〈0．05）。血清BALP和TRACP-5b组间比较差异有统计学意义（F=89．57、7．68，P均〈0．05）。其中低氟组[（31．47±5．30）U／L]和高氟组[（54．61±2．27）U／L]，血清BALP明显高于对照组[（16．24±1．57）U／L，P均〈0．05]，高氟组高于低氟组（P〈0．05）；血清TRACP-5b，低氟组[（3．45±1．85）U／L）明显高于对照组[（1．264±0．23）U／L]和高氟组[（2．744±1．8）]U／L，P均〈0．05]。光镜下，高氟组和低氟组大鼠股骨骨皮质较对照组增厚，骨小梁增宽、排列紧密。原位杂交和免疫组化显示，近骨小梁表面的成骨细胞细胞质和细胞核呈棕黄色阳性着色。图像分析显示，Wnt3a、B—cateninmRNA和蛋白表达组间比较差异有统计学意义（F值分别为12．47、5．96，10．07、53．82，P均〈0．05）。其中低氟组（132．87±5．72、132．574-9．56，137．50±4．32、140．85±3．54）和高氟组（135．60±6．64、137．87±9．16，142．654±11．84、152．524±4．64）均高于对照组（119．864±5．04、120．584±7．84，124．01±2．63、126．75±4．65，P均〈0．05）；除β—catenin蛋白表达高氟组明显高于低氟组（P〈0．05）外，其他两组间比较差异无统计学意义（P均〉0．05）。相关分析显示，Wnt3amRNA与β—cateninmRNA表达、Wnt3a蛋白与β—catenin蛋白表达，二者之间都具有相关性（r值分别为0．731、0．658，P均〈0．05）。结论过量氟引起的大鼠骨组织的病变可能与Wnt3a、β—cateninmRNA和蛋白在成骨细胞的表达增高有关。慢性氟中毒时，氟通过刺激Wnt经典信号通路中Wnt3a、β一catenin的过表达，使成骨作用增强，从而引起骨骼的病变而发生氟骨症。
氟对大鼠成骨细胞Wnt3α、β-链蛋白mRNA和蛋白表达的影响
【摘 要】
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目的 观察氟中毒大鼠成骨细胞Wnt3α、β-链蛋白（catenin）mRNA和蛋白表达，探讨氟骨症发生与Wnt通路的关系。方法健康SD大鼠36只，体质量100—120g，按体质量将大鼠随机分为3组，每组12只。对照组大鼠饮用自来水（含氟量〈1mg／L），低氟组、高氟组大鼠分别饮用含5、50mg／L氟化钠的自来水。大鼠饲养8个月，建立慢性氟中毒模型。饲养期间检查大鼠氟斑牙发生情况，股动脉放血处死大鼠
【机 构】
：
贵阳医学院病理学教研室,550004,贵阳医学院病理学教研室,550004,贵州省人民医院病理科,贵阳医学院病理学教研室,550004,贵阳医学院病理学教研室,550004
【出 处】
：
中华地方病学杂志
【发表日期】
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2013年32期
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