姜黄素激活Nrf2对铅致SH-SY5Y细胞毒性和凋亡的保护作用研究

• 作 者: 李芬 宋振 薄立超 吕玲 陈军
• 机 构: 300383 天津市西青区疾病预防控制中心,中国医学科学院血液病医院血液学研究所,300383 天津市西青区疾病预防控制中心,华中科技大学同济医学院公共卫生学院劳动与环境卫生学系,华中科技大学同济医学
• 出 处: 中华劳动卫生职业病杂志
• 发表日期: 2016年34期
• 关键词: 醋酸铅 SH-SY5Y细胞 凋亡 姜黄素 核因子E2相关因子2

目的

研究姜黄素激活核因子E2相关因子2（Nrf2）对铅致人神经母细胞瘤（SH-SY5Y）细胞毒性和凋亡的保护作用以及对凋亡相关蛋白表达的影响。

方法

分别用浓度为0、0.2、1.0、5.0和10.0 μmol/L姜黄素处理细胞24 h后，提取核蛋白，用凝胶迁移试验（EMSA）测细胞核内Nrf2-抗氧化反应元件（ARE）结合能力，确定姜黄素处理最适浓度；醋酸铅染毒浓度分为对照组（0 μmol/L）、低剂量组（5 μmol/L）、中剂量组（25 μmol/L）、高剂量组（125 μmol/L），用5.0 μmol/L姜黄素浓度预处理细胞24 h后，再按确定浓度的醋酸铅对细胞进行染毒，采用3-（4，5-二甲基噻唑-2）-2，5-二苯基四氮唑溴盐（MTT）试验检测细胞活力，流式细胞术检测细胞凋亡，蛋白印迹试验（western blotting）法检测凋亡相关蛋白的表达水平。

结果

醋酸铅染毒12 h后，与醋酸铅低、中、高剂量组[（92.92±0.14）%、（91.15±0.67）%、（85.98±0.45）%]比较，姜黄素（5.0 μmol/L）+醋酸铅低、中、高剂量组SH-SY5Y细胞存活率[（98.42±1.12）%、（95.30±1.17）%、（94.50±1.45）%]均明显升高，差异均有统计学意义（P<0.05）；醋酸铅染毒24 h后，与醋酸铅中、高剂量组[（88.40±4.13）%、（83.63±3.42）%]比较，姜黄素（5.0 μmol/L）+醋酸铅中、高剂量组SH-SY5Y细胞存活率[（93.10±1.63）%、（90.13±2.03）%]均明显升高，差异均有统计学意义（P<0.05）；醋酸铅高剂量组SH-SY5Y细胞的凋亡率为[（6.17±1.31）%]，明显高于对照组[（3.30±0.53）%]，差异有统计学意义（P<0.05）；姜黄素（5.0 μmol/L）+醋酸铅高剂量组SH-SY5Y细胞凋亡率[（2.97±0.15）%]明显低于醋酸铅高剂量组，差异有统计学意义（P<0.05）；醋酸铅染毒使胞质中B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）相关X蛋白（Bax）、细胞色素C（cytochrome C）、胱天蛋白酶-3（caspase-3）的表达升高，Bcl-2的表达降低；姜黄素（5.0 μmol/L）+醋酸铅高剂量组Bax、cytochrome C、caspase-3的表达低于醋酸铅高剂量组，差异均有统计学意义（P<0.05）。

结论

姜黄素激活Nrf2对铅致SH-SY5Y细胞的毒性和凋亡有保护作用，Nrf2对凋亡的保护作用可能与其对凋亡相关蛋白的调节有关。