荧光定量PCR检测前列腺特异膜抗原及其变异体DNA的方法学

• 作 者: 严海燕 谢文锋 钟日辉 劳伟思 陈梅 曹开源
• 机 构: 中山大学孙逸仙纪念医院检验科,广东,广州,510120;中山大学基础医学院临床检验标准化研究中心,510080
• 出 处: 中国误诊学杂志
• 发表日期: 2010年25期
• 关键词: 聚合酶链反应 前列腺特异抗原/分析 DNA/分析

目的 拟建立以荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)检测前列腺特异性膜抗原(PSMA)及其变异体5(PSMA5)DNA的定量方法 .方法 自行设计三对引物,自制PC3.0-T-PSMA及PC3.0-T-PSMA5 质粒作为标准品,采用FQ-RT-PCR检测前列腺癌LNCap细胞中PSMA及PSMA5 DNA的含量.结果 标准曲线的斜率为-0.29,相关系数为0.995,成功地扩增出前列腺癌LNCap细胞中PSMA及PSMA5基因的目标DNA片段.结论 应用自行设计的引物及标准品的FQ-RT-PCR能对前列腺癌细胞株中PSMA及变异体PSMA5的DNA进行定量PCR检测.