Snail启动子荧光素酶报告基因载体的构建及其应用

• 作 者: 江冠民 李玲玲 张坤水 谢婉莹 张秋桂 杜军
• 机 构: 南华大学附属第一医院检验科,中山大学附属第五医院中心实验室,中山大学附属第二医院药剂科,中山大学药学院微生物与生化药学
• 出 处: 中国现代医学杂志
• 发表日期: 2013年31期
• 关键词: 上皮细胞间质变 SNAIL 肿瘤转移 启动子 epithelial-mesenchymal transitions Snail tumor metastasis
• 基金项目: 湖南省自然科学基金（No：13JJ4078）, 国家自然科学基金（No：81071712,81272311）, 国家“973”计划资助项目（No：2011CB935800）

目的构建Snail启动子荧光素酶报告基因载体pGL3-Basic-Snai1-luc并对其进行生物活性的鉴定及其初步的应用研究。方法通过PCR技术从人血液基因组中钓出我们需要的具有启动子活性的Snail片段,双酶切后与双酶切的pGL3-Basic空载体连接成重组体pGL3-Basic-Snai1-luc,通过转化扩增,筛选出阳性克隆,并通过酶切,测序及生物学活性检测鉴定构建好的荧光素酶报告基因载体。结果成功地构建了pGL3-Basic-Snai1-luc荧光素酶报告基因载体,并在CNE2细胞内鉴定了其在T