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目的
探讨超极化激活环核苷酸门控(HCN)通道在人肺组织标本及人肺上皮细胞系中的表达情况，并进行相关功能学研究。
方法收集临床肺癌手术患者癌旁正常肺组织标本，体外培养人肺上皮H441。采用聚合酶链反应和蛋白质免疫印迹技术检测人肺组织标本和人肺上皮细胞中HCN通道的表达水平。应用尤斯灌流室实验装置测定H441单层细胞的短路电流，检测HCN通道的相关功能。
结果聚合酶链反应结果显示，HCN 4和HCN 1通道扩增产物经琼脂糖凝胶电泳出现116 bp和91 bp的目的条带，HCN 4和HCN 1亚型在人肺组织和H441细胞系中均有mRNA水平的表达，而HCN 2和HCN 3亚型未见表达。用10%聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后，在99 000和130 000分别出现HCN 4和HCN 1的目的条带，HCN 4和HCN 1亚型在人肺组织和H441细胞系中均有表达，HCN 2和HCN 3亚型未见表达。尤斯灌流室系统测定短路电流的变化，3、10、30、100、300 μmol/L的ZD7288能够剂量依赖性抑制人H441单层细胞的短路电流，根据Boltzmann方程拟合后的半数抑制率为85.8 μmol/L。
结论HCN 4/1通道亚型在人肺组织中具有组织和功能学表达，为临床寻求合适药物治疗肺脏相关疾病提供了理论基础。