【摘 要】
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目的 探讨松果菊苷对皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖及凋亡的影响及其作用机制.方法 体外培养人皮肤鳞状细胞癌A431细胞,采用不同质量浓度(12.5、25.0、50.0μg/L)的松果菊苷处理A431细胞.将circ_0046264对照空载体(pcDNA)、circ_0046264过表达载体(pcDNA-circ_0046264)、miR-510寡核苷酸阴性对照(anti-miR-NC)、miR-510寡核苷酸抑制物(miR-510 inhibitor)分别转染至A431细胞.将circ_0046264小分
【机 构】
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郑州颐和医院 皮肤科,河南 郑州 450000;河南中医药大学第一附属医院 皮肤科,河南 郑州 450000
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目的 探讨松果菊苷对皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖及凋亡的影响及其作用机制.方法 体外培养人皮肤鳞状细胞癌A431细胞,采用不同质量浓度(12.5、25.0、50.0μg/L)的松果菊苷处理A431细胞.将circ_0046264对照空载体(pcDNA)、circ_0046264过表达载体(pcDNA-circ_0046264)、miR-510寡核苷酸阴性对照(anti-miR-NC)、miR-510寡核苷酸抑制物(miR-510 inhibitor)分别转染至A431细胞.将circ_0046264小分子干扰RNA(si-circ_0046264)、miR-510寡核苷酸模拟物(miR-510 mimic)分别转染至A431细胞后加入50.0μg/mL松果菊苷进行处理.采用MTT法、平板克隆形成实验与流式细胞术分别检测细胞增殖、克隆形成及凋亡率;qRT-PCR法与Western blotting法分别检测circ_0046264、miR-510、阿片样物质结合蛋白(OPCML)的表达量;双荧光素酶报告实验检测circ_0046264与miR-510的靶向关系,以及miR-510与OPCML的靶向关系.结果 松果菊苷可浓度相关性地升高A431细胞增殖抑制率、凋亡率和circ_0046264、OPCML的表达量,并可降低miR-510的表达量,集落形成数减少(P<0.05).转染pcDNA-circ_0046264或miR-510 inhibitor后,OPCML蛋白表达显著升高,细胞增殖抑制率和凋亡率显著升高,集落形成数明显减少(P<0.05).circ_0046264可靶向调控miR-510的表达,OPCML是miR-510的靶基因;转染si-circ_0046264或miR-510 mimic均可降低松果菊苷对A431细胞增殖及凋亡的作用.结论 松果菊苷可通过调节circ_0046264/miR-510/OPCML表达而抑制皮肤鳞状细胞癌细胞增殖及诱导细胞凋亡.
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