荧光杂交探针实时聚合酶链式反应快速检测甘露聚糖结合凝集素启动子区基因变异方法的建立

• 作 者: 李胜光 黄烽 刘湘源 邓心新 徐明 丁玉珍 丛贤滋
• 机 构: 解放军总医院风湿科,解放军总医院生化科,北京大学第三医院风湿免疫科
• 出 处: 中华临床医师杂志（电子版）
• 发表日期: 2008年6期
• 关键词: 补体激活途径 甘露聚糖结合凝集素 多态现象 遗传 聚合酶链反应 熔解曲线 Complement pathway mannose-binding lectin

目的建立用荧光杂交探针实时聚合酶链式反应（Real-timePCR）检测人甘露聚糖结合凝集素（MBL）启动子区基因变异新型的基因分型法——Tm基因分型法。方法收集30例健康献血员外周抗凝全血,提取基因组DNA。通过LightCycler实时PCR仪描绘扩增的目标DNA片段的熔解曲线,根据熔解温度（Tm）峰值判定待测标本的基因变异类型。最后,用基因测序法检测PCR产物来验证Tm基因分型法的准确性。结果建立了新型的Tm基因分型法,且测定PCR产物的时间仅180min,检测结果与测序法完全吻合。结论Tm基因分型