【摘 要】
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目的构建一种嵌合过敏原,同时保有草和豚草过敏原的特征,而其抗原性得到改变。方法以业经克隆到草和豚草过敏原基因片段的混合物为模板,利用桥式PCR和重叠引物法,扩增得
【机 构】
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广州医学院第二附属医院过敏科; 汕头大学医学院变态反应学与炎症学研究所 510260; 汕头大学医学院变态反应学与炎症学研究所;
【基金项目】
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国家自然科学基金资助(No.30470996);广东省自然科学基金资助(No.034617)
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目的构建一种嵌合过敏原,同时保有草和豚草过敏原的特征,而其抗原性得到改变。方法以业经克隆到草和豚草过敏原基因片段的混合物为模板,利用桥式PCR和重叠引物法,扩增得到嵌合基因,利用测序、蛋白表达及抗原性分析软件对所得嵌合基因编码蛋白与MHCⅡ类分子的结合表位进行评价。结果通过以上方法获得嵌合基因3例,序列分析表明,3例嵌合基因AL03-1、AL03-2及AD03-4分别与原始克隆LCM9、LCS13(LCM20)及D03具有较高的同源性,而其抗原性分别比相似的原始克隆略强、略强及明显增强,融合表达带型与原始克隆的也基本一致。结论采用桥式PCR及重叠引物法,嵌合基因及其表达载体得到成功构建,所得的嵌合基因将满足不同体质或不同免疫力的人群、不同免疫治疗阶段的脱敏治疗的临床需要。
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