苦瓜MAP30蛋白功能区段缺失体构建及其生物活性研究

来源 :药物生物技术 | 被引量 : 0次 | 上传用户：fkjunjin

【摘要】

：

通过PCR技术从质粒pET30a-MAP30中分别得到编码M1（D1-K195）、M2（D1-E187）、M3（All—K195）、M4（All—E187）4个功能区段缺失体蛋白的序列，经测序鉴定后亚克隆到原核表达载体pET22b中，表达

【作者】

：

刘思林育泉周鹏陈海宁符兆理

【机构】

：

中国热带农业科学院热带生物技术研究所,山东省干细胞工程技术研究中心,海南国栋药物有限公司

【出处】

：

药物生物技术

【发表日期】

：

2007年6期

【关键词】

：

MAP30 功能区段克隆表达活性分析 MAP30 Functional fragments Cloning Expression Cytotoxi

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通过PCR技术从质粒pET30a-MAP30中分别得到编码M1（D1-K195）、M2（D1-E187）、M3（All—K195）、M4（All—E187）4个功能区段缺失体蛋白的序列，经测序鉴定后亚克隆到原核表达载体pET22b中，表达载体用CaCl2介导的化学转化法转化E．coli BL21（DE3）感受态细胞，然后利用菌落PCR筛选阳性克隆。工程菌在28℃时经1mmol／LIPTG诱导5h时实现高效表达，4种重组蛋白在大肠杆菌中都以包涵体形式存在。利用MTT法分析4个重组蛋白复性液的抗肿瘤活性，结果

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