剪股颖粒线虫幼虫形态与分子检测方法

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剪股颖粒线虫 (Anguinaagrostis)是牧草、草坪上的重要线虫 ,该线虫在进口草籽中常以幼虫形态出现 ,与其它粒线虫属幼虫形态相似 ,很难快速鉴定到种。本实验通过对单条幼虫DNA进行提取和PCR扩增 ,获得其rDNA的ITS区域 ,测序后与基因库中的剪股颖粒线虫的rDNA的ITS区域序列进行比较 ,其结果与基因库中编码为AF396 343 1的核酸序列吻合 ,从而鉴定为剪股颖粒线虫。此外 ,还使用 5种限制性内切酶对PCR产物进行了酶切 ,获得了剪股颖粒线虫的ITS RFLP指纹图谱。 Anguinaagrostis is an important nematode on grasses and turf. The nematode often appears as larvae in imported grass seeds. Similar to the other larvae, it is difficult to identify the species rapidly. In this experiment, the ITS region of rDNA was obtained by DNA extraction and PCR amplification from a single larva. The ITS region sequences of rDNA from C. elegans were sequenced and compared with the rDNA ITS sequences of GenBank, AF396 343 1 match the nucleic acid sequence, which identified as C. elegans nematodes. In addition, PCR products were also digested with five kinds of restriction enzymes to obtain ITS RFLP fingerprinting of C. elegans.
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