【摘 要】
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目的 观察花色苷对体外高糖培养的视网膜Müller细胞L-谷氨酸/L-天门冬氨酸转运体(GLAST)表达的影响.方法 取出生后10 d的雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠视网膜组织,体外原代培
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目的 观察花色苷对体外高糖培养的视网膜Müller细胞L-谷氨酸/L-天门冬氨酸转运体(GLAST)表达的影响.方法 取出生后10 d的雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠视网膜组织,体外原代培养Müller细胞.第2～4代细胞用于实验.将实验分为正常对照组(A组)、高糖对照组(B组)、高糖+30 μmol/L花色苷组(C组)、高糖+60 μmol/L花色苷组(D组)、高糖+100μmol/L花色苷组(E组)进行.采用噻唑蓝比色法(MTT)测定波长570 nm处的吸光度[A,旧称光密度(OD)]值,以各组A值计算细胞相对存活率.采用免疫蛋白印迹法(Western blot)检测各组大鼠视网膜Müller细胞上GLAST的蛋白表达.结果 MTT检测显示,A、B、C、D、E组A值分别为0.450 8±0.020 4、0.270 1±0.031 4、0.332 0±0.023 2、0.428 3±0.017 2、0.361 9±0.027 0,细胞相对存活率分别为100.0%、59.9%、73.6%、95.0%、80.3%.其中,C、D、E组A值均较B组增高,差异有统计学意义(F=32.25,P＜0.05);D组A值较C、E组显著增高,差异也有统计学意义(F=21.07,P＜0.05).Western blot检测显示,B组大鼠视网膜Müller细胞的GLAST蛋白表达较A组降低,差异有统计学意义(t=5.25,P＜0.05);A、C、D、E组间大鼠视网膜Müller细胞的GLAST蛋白表达无明显变化,差异无统计学意义(F=2.979,P＞0.05).结论 花色苷可逆转高糖引起的Müller细胞GLAST蛋白表达下降.
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