【摘 要】
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目的 研究新型H2S供体对癫痫模型大鼠的作用及其可能的机制,即通过激活PI3K/Akt通路、影响Bcl-2/Bax蛋白表达进而减少癫痫大鼠海马神经元凋亡.方法 通过腹腔注射戊四氮(penty
【机 构】
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广州医科大学基础医学院生理学教研室 ,广州,511436广州医科大学附属第五医院皮肤美容科 ,广州,510700;
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目的 研究新型H2S供体对癫痫模型大鼠的作用及其可能的机制,即通过激活PI3K/Akt通路、影响Bcl-2/Bax蛋白表达进而减少癫痫大鼠海马神经元凋亡.方法 通过腹腔注射戊四氮(pentylenetetrazole,PTZ)的方法建立大鼠癫痫持续状态(status epilepticus,SE)模型,并经侧脑室注射给予不同药物处理,将实验大鼠随机分为5组:正常对照组(Control组)、PTZ致痫组(SE组)、H2S预处理组(H2S+SE组)、DMSO预处理组(DMSO+SE组)、抑制剂组(LY294002+SE组).采用行为学观察记录大鼠癫痫发作情况;植入脑电引流电极记录大鼠海马脑电变化;TUNEL免疫荧光标记法检测大鼠海马组织细胞凋亡情况;Western blot检测大鼠海马组织中PI3K、Akt、Bcl-2、Bax蛋白表达情况.结果 行为学观察发现LY294002+SE组大鼠癫痫发作级别最高,DMSO+SE组和SE组次之,H2S+SE组较低;H2S+SE组癫痫发作潜伏期最长,DMSO+SE组和SE组次之,而LY294002+SE组最短.脑电图检测提示LY294002+SE组平均波幅最高,其次为DMSO+SE组和SE组,高于H2S+SE组,对照组无痫样波.TUNEL染色结果显示,与DM-SO+SE组和SE组相比,LY294002+SE组海马CA1区凋亡最严重,而H2S+SE组凋亡细胞较少.Western blot结果显示:PI3K、Akt、Bcl-2/Bax表达量从低到高依次为正常对照组、LY294002+SE组、SE/DMSO+SE组、H2S+SE组;与SE组相比,H2S+SE组Bcl-2/Bax表达量显著上调(P<0.05).结论 H2S通过激活PI3K/Akt通路,改变该通路所介导的凋亡蛋白Bcl-2和Bax的表达比例,从而发挥抑制癫痫、保护海马神经元的作用,这种作用可能与抑制海马神经元的凋亡有关.
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