兔源强毒力金黄色葡萄球菌双重PCR检测方法的建立

• 作 者: 王锦祥 孙世坤 陈岩锋 陈冬金 桑雷 谢喜平
• 机 构: 福建省农业科学院畜牧兽医研究所
• 出 处: 福建农业学报
• 发表日期: 2020年8期
• 关键词: 兔 金黄色葡萄球菌 强毒力菌株 低毒力菌株 双重PCR检测方法 rabbitStaphylococcus aureushyper-virulent strain
• 基金项目: 福建省科技计划公益类专项(2019R1026-9),国家兔产业技术体系建设专项(CARS-43-G-5)

【目的】建立检测兔源强毒力金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的双重PCR检测方法,为兔葡萄球菌病的诊断提供技术支持。【方法】根据兔源金黄色葡萄球菌的nuc和pvl两种毒力基因的保守序列分别设计了两对特异性引物进行双重PCR扩增,对双重PCR反应体系的混合引物浓度和退火温度进行优化,对双重PCR检测方法的特异性、敏感性和准确性进行验证。【结果】当双重PCR反应体系混合引物的浓度为0.6μmol·L^-1、退火温度为59.6℃时,双重PCR的扩增效果最优。该双重PCR检测方