RNA的错误剪接影响转基因的表达

• 作 者: 卢一凡 田靫
• 机 构: 军事医学科学院生物工程研究所,中国医学科学院心血管病研究所
• 出 处: 生物化学与生物物理进展
• 发表日期: 1999年3期
• 关键词: 转基因鼠 低表达 RNA剪接 G-CSF transgenic mice low expression human granulocyte colonyst

利用ＰＣＲ扩增方法获得１．５ｋｂ人粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）基因组基因，将其受控于２．６ｋｂ的鼠乳清酸蛋白（ＷＡＰ）基因的启动子下，构建成乳腺表达载体。通过显微注射方法建立转基因鼠，ＰＣＲ及ＤＮＡ印迹鉴定证实获得两只转基因阳性鼠。在其乳腺表达出极低的Ｇ－ＣＳＦ。为探讨低表达的原因，采用ＲＴ－ＰＣＲ方法，从转基因鼠乳腺获得Ｇ－ＣＳＦ ｃＤＮＡ，序列分析表明，其ＲＮＡ剪接出现错误，将其第四外显子