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目的探讨分离及培养人胎肝细胞的最佳方法。方法比较两种灌流消化法对分离人胎肝细胞的效果,观察不同条件对体外培养人胎细胞生长及生存时间的影响。结果经腹主动脉及脐静脉双灌流消化法分离人胎肝细胞效果明显优于单纯经脐静脉灌流消化法,前者肝细胞获得率为(5.97±1.81)×108/kg体重,后者肝细胞获得率为(4.12±2.31)×108/kg体重(P<0.05)。促肝细胞生长素对体外培养的人胎肝细胞生长和生存时间无明显影响,均在培养第10~14天开始变性、坏死。鼠尾胶可延长体外培养人胎肝细胞的生存时间达20~28 d。与球体细胞培养方法相结合,人胎肝细胞在体外生存时间延长至30~38 d。结论人胎肝细胞的分离应首选经腹主动脉及脐静脉双灌流消化法。人胎肝细胞在体外生存时间受培养条件的影响。