【摘 要】
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目的：建立一种简便高效的原代神经元培养方法。方法：出生12 h内的Wistar乳鼠,分离皮质后剪碎,0.25%胰酶消化30 min,漂洗后轻柔吹散细胞,过滤后1 000 rpm离心5 min,弃上清,加接
【机 构】
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济南军区总医院,解放军第303医院,第三军医大学大坪医院野战外科研究所
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目的：建立一种简便高效的原代神经元培养方法。方法：出生12 h内的Wistar乳鼠,分离皮质后剪碎,0.25%胰酶消化30 min,漂洗后轻柔吹散细胞,过滤后1 000 rpm离心5 min,弃上清,加接种液吹匀后过滤,静置3～5 min,取上层液体计数并接种。接种后4、45、96 h全量换液,之后每3 d半量换液1次。培养第5天评估神经元,NSE染色、NMDAR1染色和台盼兰染色。结果：神经元纯度高（〉95%）,死亡率低（〈5%）,细胞形态好,交联充分,背景干净。结论：利用新生大鼠皮质建立了高质量、高产
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