慢病毒载体介导miR-146a转染大鼠骨髓间充质干细胞的实验研究

• 作 者: 买买提沙吾提阿吉·麦麦提 马原 朱旭
• 机 构: 新疆医科大学第六临床医学院,新疆医科大学第六附属医院脊柱外一科
• 出 处: 新疆医科大学学报
• 发表日期: 2019年6期
• 关键词: 骨髓间充质干细胞 慢病毒载体 增强型绿色荧光蛋白(EGFP) 微小RNA-146a(miR-146a) BMSCs Lentiviral vector EGFP
• 基金项目: 新疆维吾尔自治区科学基金面上项目(2017D01C261).

目的探讨微小RNA-146a(miR-146a)体外转染大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)应用于基因治疗的可行性。方法体外分离、培养并鉴定BMSCs,采用具有高效转染非分裂期细胞的慢病毒载系统将miR-146a导入BMSCs中,采用绿色荧光蛋白(EGFP)荧光技术、实时荧光定量PCR(qPCR)、Western Blot技术分别检测转染率、miR-146a及白介素-1(IL-1)受体相关激酶1(IRAK1)和肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)蛋白水平表达情况。结果经流式细胞技术鉴定第三代BMSCs中