【摘 要】
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目的 研制鲍氏不动杆菌核酸检测试剂盒国家参考品,用于该试剂盒的质量评价.方法 收集10株鲍氏不动杆菌和10株阴性参考菌株(同属不同种的不动杆菌及与鲍氏不动杆菌感染部位相
【机 构】
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中国食品药品检定研究院中国医学细菌保藏管理中心,北京102629
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目的 研制鲍氏不动杆菌核酸检测试剂盒国家参考品,用于该试剂盒的质量评价.方法 收集10株鲍氏不动杆菌和10株阴性参考菌株(同属不同种的不动杆菌及与鲍氏不动杆菌感染部位相同或感染症状相似的病原菌)新鲜培养物,进行灭活、分装.并对参考品进行均匀性及稳定性评估,同时验证其准确性、特异性、重复性、最低检出限.组织7家实验室对制备的参考品开展协作标定.结果 成功制备了鲍氏不动杆菌核酸检测试剂盒国家参考品,包括10个阳性参考品、10个阴性参考品、最低检出限参考品和重复性参考品.阳性参考品、最低检出限参考品和重复性参考品Ct值的CV均＜2.5％;与-20℃保存的参考品比较,于2～8、25、37℃分别放置3、7、14 d及冻融3、5次后参考品Ct值的差异均无统计学意义(P＞0.05).制备的参考品具有良好的准确性、特异性、重复性,最低检出限为1.0 x 103个/mL.参加协作标定的7家实验室中,除1家出现假阳性结果,其他实验室的准确性、特异性和重复性验证均符合规定;有1家实验室的最低检出限高于1.0 x 103个/mL.结论 本实验研制的参考品可用于鲍氏不动杆菌核酸检测试剂盒的质量评价.
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