pHsa—m122真核表达载体的构建及其表达活性的鉴定

• 作 者: 陈姗姗 余冰 倪明 吕婷婷 张小勇 江敏 陆蒙吉
• 机 构: 华中科技大学同济医学院病原生物学系,华中科技大学同济医院感染科
• 出 处: 热带医学杂志
• 发表日期: 2008年4期
• 关键词: 载体构建 微RNA MIR-122 PSUPER vector construction microRNA miR-122 pSuper
• 基金项目: 湖北省自然科学基金（No.2006ABA143）,华中科技大学同济医学院院基金（No.200601510747）.

目的构建肝脏特异性的微RNA—miR-122真核细胞表达载体并对其表达活性进行鉴定。方法经PCR从人基因组DNA中扩增肝脏特异性的微RNA—miR-122的前体序列，引入酶切位点和Poly T转录终止序列，将其插入siRNA专用真核表达载体pSuper中。将构建载体进行酶切、测序鉴定，再通过共转染含miR-122靶序列的GFP表达质粒后．经荧光显微镜和流式细胞仪及Western Blot检测，鉴定载体功能性表达。结果miR-122的前体序列成功地克隆到真核表达载体pSuper上，且可表达出具有生物活性的m