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目的
探讨腺苷三磷酸(ATP)对冠状动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道(BK通道)的激活作用及其机制。
方法采用酶消化法急性分离正常大鼠冠状动脉平滑肌细胞;膜片钳实验技术记录全细胞状态下BK通道电流;钙离子成像技术记录ATP对细胞内钙离子浓度影响。
结果膜片钳实验结果显示,加入1 mmol/L ATP前后,BK通道电流密度分别为(137±13)pA/pF和(179±15)pA/pF(P<0.05);钙离子成像结果显示,加入0.5 mmol/L ATP前后,细胞内钙离子浓度荧光信号强度比值分别为2.46±0.08和4.04±0.21(P<0.05)。分别采用嘌呤(P2Y1)受体阻滞剂MRS2179、磷脂酶C(PLC)受体阻滞剂U73122和三磷酸肌醇(IP3)受体阻滞剂2-APB孵育冠状动脉平滑肌细胞,再测定加入0.5 mmol/L ATP后3组细胞内钙离子浓度荧光信号强度比值,分别是2.70±0.06、2.65±0.12和2.69±0.13,与未加入3种阻滞剂相比,钙离子浓度荧光信号强度比值均明显降低(P<0.05)。
结论ATP可以通过P2Y1-PLC-IP3通路升高细胞内钙离子浓度,从而激活BK通道。