强力霉素诱导型Cas9基因编辑小鼠胚胎干细胞系的构建

• 作 者: 姚玉琛 朱少华 曹佳妮 张琳 杨月伟 赵同标
• 机 构: 曲阜师范大学生命科学学院,中国科学院动物研究所干细胞与生殖生物学国家重点实验室
• 出 处: 发育医学电子杂志
• 发表日期: 2018年3期
• 关键词: CRISPR/Cas9 四环素诱导 条件性敲除 小鼠ES细胞系 CRISPR/Cas9 Tet-on Conditioned knockout Mouse ES
• 基金项目: 国家自然科学基金国际（地区）合作研究与交流项目-重点国际（地区）合作研究项目（31720103907）,科技部重点研发计划（2018YFA0108402）,中国科学院A类战略性先导科技专项（XDA16030302）

目的建立强力霉素（doxmycin,Dox）诱导型Cas9基因编辑小鼠胚胎干细胞系,以满足不同条件下基因编辑的实验需求。方法根据四环素（tetracycline,Tet）-on诱导表达调控系统的原理,分别构建含有调控元件反义Tet转录激活因子（reverse tetracy-cline transcriptional activator,rt TA）的表达质粒p CDH-CAG-rt TA-IRES-m Cherry和含有Tet应答元件（Tet-responsive element,TRE）及Cas9的表