【摘 要】
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目的制备兔抗人MiR-338分子多克隆抗体。方法PCR法扩增出MiR-338基因,将其克隆入原核表达载体pET28中,转化大肠杆菌BL21(DE3)、IPTG诱导重组蛋白的表达,Ni^2+-NTA Agarose亲
【机 构】
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深圳市龙岗中心医院,深圳市龙岗区中医院
【基金项目】
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深圳市龙岗区科技计划医疗卫生项目(编号2017040518421728)的成果之一
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目的制备兔抗人MiR-338分子多克隆抗体。方法PCR法扩增出MiR-338基因,将其克隆入原核表达载体pET28中,转化大肠杆菌BL21(DE3)、IPTG诱导重组蛋白的表达,Ni^2+-NTA Agarose亲和层析法纯化重组蛋白,以之为免疫原免疫家兔,制备多克隆抗体,并用ELISA、Western blot和免疫组织化学法检测抗体。结果成功构建了MiR-338原核表达载体pET28/MiR-338,高效表达并纯化MiR-338蛋白,间接ELISA检测所制备抗体的效价为1:6400,Western b
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