【摘 要】
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目的 建立一种能快速准确检测hcmv-miR-UL112的方法。方法 根据miRBase网站中公布的hcmv-miR-UL112基因序列,通过设计引物、探针及优化反应条件,建立了一种实时荧光定量PCR方
【机 构】
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舟山医院检验中心,舟山医院心血管内科,舟山医院细胞分子生物学实验室,温州医科大学
【基金项目】
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浙江省自然科学基金资助项目（LY13H020001,LQ13H10001）,浙江省公益性技术应用研究计划（2012C37036）,舟山市科技计划项目（2011C32004,2012C13024）
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目的 建立一种能快速准确检测hcmv-miR-UL112的方法。方法 根据miRBase网站中公布的hcmv-miR-UL112基因序列,通过设计引物、探针及优化反应条件,建立了一种实时荧光定量PCR方法对hcmv-miR-UL112进行定量检测,并进行敏感度、重复性和特异性实验,同时对PCR产物进行测序验证。结果 获得了1条特异性茎环反转录引物,一条特异性PCR正向引物和通用反向引物。PCR最佳反应条件为95℃ 10min,53℃ 2min;95℃ 15s,57℃ 40s,共40个循环。该方法的批内变异
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