【摘 要】
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为解决脲酶的国产化问题,建立了从黄豆中提取脲酶的全套流程,主要包括醋酸盐缓冲液提取、亚硫酸钠盐析和离子交换色谱等步骤,操作简便,成本低廉.收率达44.09%.产品比活性达67
【机 构】
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解放军兰州医学高等专科学校生化教研室
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为解决脲酶的国产化问题,建立了从黄豆中提取脲酶的全套流程,主要包括醋酸盐缓冲液提取、亚硫酸钠盐析和离子交换色谱等步骤,操作简便,成本低廉.收率达44.09%.产品比活性达67.15 U/mg蛋白,可满足临床测定尿素的需要.再经分子筛色谱,可获得更纯的黄豆脲酶(比活达1 159.67 U/mg蛋白).酶性质研究结果显示,黄豆脲酶的分子量为293 500,pI为3.9,在EDTA和Tris-琥珀酸缓冲系统中的Km值分别为0.011 76mol.L-1和0.018 18 mol.L-1,Vmax分别为3.42 μmol.min-1和4.35 μmol.min-1,在EDTA、磷酸盐和Tris-琥珀酸缓冲系统中的最适pH分别为6.00、7.00和6.50,最适温度为65℃.这些性质与巨豆脲酶有显著差异.
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