【摘 要】
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目的:观察北五味子木脂素的单体成分之一五味子乙素(SchB)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的新生SD大鼠心脏成纤维细胞(CFb)增殖、细胞周期及Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原蛋白表达水平的影响,探讨磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/细胞周期抑制蛋白P27(PI3K/Akt/P27kip1)信号通路的作用机制.方法:取出生1～3 d的SD大鼠乳鼠的心室组织,采用胰酶消化和差速贴壁法培养经鉴定为所需要的CFb.实验分为对照组、模型组、LY294002(PI3K抑制剂)组、SchB组和LY294002(提前30 min加入)
【机 构】
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北华大学药学院药理教研室,吉林 吉林 132013;北华大学附属医院呼吸科,吉林 吉林132011;广东医科大学基础医学院病理教研室,广东 东莞 523808
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目的:观察北五味子木脂素的单体成分之一五味子乙素(SchB)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的新生SD大鼠心脏成纤维细胞(CFb)增殖、细胞周期及Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原蛋白表达水平的影响,探讨磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/细胞周期抑制蛋白P27(PI3K/Akt/P27kip1)信号通路的作用机制.方法:取出生1～3 d的SD大鼠乳鼠的心室组织,采用胰酶消化和差速贴壁法培养经鉴定为所需要的CFb.实验分为对照组、模型组、LY294002(PI3K抑制剂)组、SchB组和LY294002(提前30 min加入)+SchB组,采用0.1μmol?L-1AngⅡ刺激CFb,作用24 h后用四氮唑盐(MTT)比色法检测各组CFb增殖抑制率,免疫细胞化学染色法检测各组CFb中Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原蛋白表达水平,流式细胞术检测各组不同细胞周期CFb百分率并计算增殖指数(PI),Western blotting法检测各组CFb中PI3K、Akt、磷酸化Akt(p-Akt)和P27kip1蛋白表达水平.结果:与对照组比较,模型组CFb增殖抑制率明显升高(P<0.01),CFb中Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原蛋白表达水平明显升高(P<0.01),G0/G1期CFb百分率明显降低(P<0.01),S期CFb百分率和PI明显升高(P<0.01),CFb中PI3K和p-Akt蛋白表达水平明显升高(P<0.01),P27kip1蛋白表达水平明显降低(P<0.01);与模型组比较,LY294002组、SchB组和LY294002+SchB组CFb增殖抑制率明显降低(P<0.05或P<0.01),CFb中Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01),G0/G1期CFb百分率明显升高(P<0.05或P<0.01),S期CFb百分率和PI明显降低(P<0.05或P<0.01),PI3K和p-Akt蛋白表达水平明显降低(P<0.05),P27kip1蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01).结论:SchB能抑制AngⅡ诱导的CFb增殖和胶原蛋白沉积,其机制可能与调控PI3K/Akt/P27kip1信号转导通路有关.
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