【摘 要】
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目的 运用实时细胞分析(RTCA)法和MTT法检测干酪乳杆菌(L.casei)、肠出血性大肠杆菌(EHEC)的细胞毒性,并比较两者优缺点.方法 将L.casei及EHEC的菌液、菌体裂解液(MOI=200)以
【机 构】
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南华大学公共卫生学院,湖南衡阳 417000;军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所,北京 100071;军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所,北京,100071;衡阳市健康危害因子检验检疫
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目的 运用实时细胞分析(RTCA)法和MTT法检测干酪乳杆菌(L.casei)、肠出血性大肠杆菌(EHEC)的细胞毒性,并比较两者优缺点.方法 将L.casei及EHEC的菌液、菌体裂解液(MOI=200)以及上清液(25％)感染HT-29和LoVo细胞,经RTCA法和MTT法观察细菌对细胞的校正细胞指数(NCI)及细胞活力的影响.结果 RTCA法与MTT法结果一致,L.casei的活菌、菌体裂解液对HT-29细胞和LoVo细胞无明显毒性.EHEC的活菌对HT-29细胞和LoVo细胞有明显毒性,其菌体裂解液对HT-29细胞有明显毒性、对LoVo细胞无明显毒性.在上清液实验中,RTCA法检测出L.casei和EHEC对HT-29细胞无明显毒性,而LoVo细胞受培养基影响未能正确反映出上清液细胞毒性结果.结论 与MTT法相比,RTCA法更适于细菌细胞毒性检测,但应在实验前选择合适的细胞系及种植浓度,建议在选用RTCA法检测细胞毒性时选择两种或两种以上细胞系,多方验证以避免漏检.
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