【摘 要】
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目的：构建针对E2F-3基因的siRNA表达载体。方法：化学合成3对编码短发夹RNA序列的、靶向E2F-3基因的寡核苷酸链,各64个碱基，退火、克隆到经BamHⅠ、HindⅢ双酶切的pRNAT-U6．1／Neo载
【机 构】
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天津医科大学第二医院,吉林大学第一医院移植中心
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目的：构建针对E2F-3基因的siRNA表达载体。方法：化学合成3对编码短发夹RNA序列的、靶向E2F-3基因的寡核苷酸链,各64个碱基，退火、克隆到经BamHⅠ、HindⅢ双酶切的pRNAT-U6．1／Neo载体上，重组构建RNAi质粒。通过双酶切、PCR鉴定及基因片段序列分析验证构建效果。结果：重组构建的pRNAT—U6．1／Neo载体经PCR分析及插入基因片段序列分析，结果表明64个碱基成功插入到预计位点，并且序列完全一致，插入序列无点突变位点。结论：载体的成功构建为进一步研究E2F-3基因在膀胱肿
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