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目的 构建含有天然钙化层结构的骨软骨支架,为组织工程修复骨软骨缺损提供一种理想的支架材料. 方法 选择新鲜成年猪膝关节为制备原料,切取软骨层用以制备Ⅱ型胶原水凝胶;环钻钻取直径8 mm包含天然钙化层结构的骨柱,进行脱细胞处理,组织学切片染色观察脱细胞情况;将Ⅱ型胶原水凝胶接种于含天然钙化层结构脱细胞骨柱上,冻干,10/L京尼平乙醇溶液交联,即得含天然钙化层结构的骨软骨模型,进行细胞接种及扫描电镜观察. 结果 含天然钙化层结构的脱细胞骨柱脱细胞效果良好,HE染色、甲苯胺蓝染色、固绿番红O染色及DAPI染色切片显示细胞清除彻底;构建复合支架中Ⅱ型胶原海绵支架空隙率为(91.1±3.8)％,孔径大小为(79.7±17.1)μm;脱细胞骨支架的孔隙率为(73.5±2.6)％,孔径大小为(470.2±158.8) μm;共建骨软骨模型细胞共培养扫描电镜观察可见细胞进入骨软骨模型并且生长良好. 结论 含有天然钙化层结构的骨软骨支架具有良好的生物相容性及合适的孔径及孔隙率,可能成为组织工程骨软骨缺损修复的理想材料。