VEGF165-tPA双基因真核表达载体的构建和体外表达

• 作 者: 王刚 刘成硅 张晓明 张凯伦 蒋雄刚
• 机 构: 华中科技大学同济医学院附属协和医院心外科,广州军区武汉总医院心胸外科
• 出 处: 华中科技大学学报(医学版)
• 发表日期: 2011年1期
• 关键词: 人血管内皮细胞生长因子165 人组织型纤溶酶原激活因子 真核表达载体 体外表达 human vascular endothelial growth factor

目的构建人血管内皮细胞生长因子165（VEGF165）和人组织型纤溶酶原激活因子（tPA）双基因的新型真核表达载体pIRES-VEGF165-tPA,并通过转染人脐静脉内皮细胞系EA.hy926细胞,验证载体的体外表达情况。方法将目的基因片段VEGF165和tPA插入到真核表达载体pIRES质粒中,体外瞬时转染人脐静脉内皮细胞系EA.hy926细胞,通过实时荧光定量RT-PCR和Western blot分别检测mRNA和蛋白水平的表达。结果成功构建pIRES-VEGF165-tPA双基因真核表达载体,测序