【摘 要】
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根据分离得到的吸水链霉菌的谷氨酰胺转胺酶基因,预测其三维结构,确定其酶活中心,并构建定点突变体。用PCR扩增谷氨酰胺转胺酶基因,通过SWISS-MODEL在线预测三维结构,找到酶
【基金项目】
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湖北省自然科学基金资助项目（2010CDZ046）
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根据分离得到的吸水链霉菌的谷氨酰胺转胺酶基因,预测其三维结构,确定其酶活中心,并构建定点突变体。用PCR扩增谷氨酰胺转胺酶基因,通过SWISS-MODEL在线预测三维结构,找到酶活中心,确定突变位点,将361位的组氨酸（CAC）突变成赖氨酸（AAA）,将突变后的基因片段连接到pET-22b（＋）上得到重组质粒pET-22b（＋）-MTG,并转入大肠杆菌BL21（DE3）中进行表达。结果显示,通过对比已有的三维结构模型,找到了酶活中心,并通过重叠延伸PCR（SOE-PCR）技术成功构建了突变体。
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