【摘 要】
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细菌在自身或外界环境因素的影响下,很容易发生基因突变、变异和重组等不可控的变化,这些变化促进了细菌的进化[1].而基因是探究细菌结构和功能的基础,因此,利用基因敲除技术验证细菌基因的功能一直是研究的热点.随着对基因探索的不断深入和技术的改进,一系列基因敲除技术相继出现,如锌指核酸酶技术(ZFN技术)、转录激活因子样效应蛋白核酸酶技术(TALEN技术)、自杀性质粒载体系统、Red同源重组技术、CRISPR/Cas等技术.而常用于细菌的基因敲除技术主要有自杀性质粒载体系统、Red同源重组技术以及CRISPR/
【机 构】
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扬州大学兽医学院,江苏扬州225009;江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏扬州225009;教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室,江苏扬州225009
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细菌在自身或外界环境因素的影响下,很容易发生基因突变、变异和重组等不可控的变化,这些变化促进了细菌的进化[1].而基因是探究细菌结构和功能的基础,因此,利用基因敲除技术验证细菌基因的功能一直是研究的热点.随着对基因探索的不断深入和技术的改进,一系列基因敲除技术相继出现,如锌指核酸酶技术(ZFN技术)、转录激活因子样效应蛋白核酸酶技术(TALEN技术)、自杀性质粒载体系统、Red同源重组技术、CRISPR/Cas等技术.而常用于细菌的基因敲除技术主要有自杀性质粒载体系统、Red同源重组技术以及CRISPR/Cas9技术.很多研究已经利用这3种技术在细菌基因功能的探索、疫苗菌株的开发等方面取得了显著成果.鉴于此,本文主要介绍了上述3种基因敲除技术的原理、应用实例及每种技术的优缺点,以期为合理有效地选择基因敲除技术应用提供一定的参考.
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为研究催化剂对巴豆醛液相选择性加氢的作用,制备了一系列具有不同金属负载量的Ir/WO3催化剂.利用XRD,TEM,H2-TPR,XPS等手段表征了上述材料的结构、形貌及化学特性.结果表明:Ir/WO3催化剂表面较高的表面酸量和较强的金属与载体相互作用力是催化剂活性提高的主要原因;不同Ir含量的Ir/WO3催化剂的转化频率相同,表明在所考察的Ir颗粒范围内(2～3 nm),该反应为非结构敏感型反应.研究为理解金属载体相互作用及颗粒尺寸效应对反应行为的影响提供了实验证据.
为建立一种快速、简便检测猫细小病毒(FPV)的聚合酶螺旋反应(PSR)恒温扩增方法,本研究参考GenBank中登录的FPV基因序列(MG924893.1),以其保守基因NS1为靶基因设计并合成分别用于普通PCR和PSR方法的2对特异性引物,以及一对加速引物,经反应条件优化,建立了检测FPV的PSR方法.优化结果显示,体系内包含6 mmol/L MgSO4、0.8 mol/L甜菜碱,67℃恒温反应45min结束反应,然后加入终浓度为20×SYBR GreenI染料,肉眼在可见光下观察颜色变化即可判定检测结果
近年来,亚砜作为反应物参与的[3,3]-重排反应,逐渐受到合成化学家的关注.通过查阅芳基、烯基亚砜与苯酚、苯胺反应的文献资料,并且分析、归纳后,进一步对亚砜与苯酚、苯胺的[3,3]-重排反应进行了总结和探讨.详细阐述了该类反应与传统重排反应不同的独特机制,以及反应产物的重要衍生化.随着亚砜化学的发展,亚砜介入的[3,3]-重排反应模型对[3,3]-重排领域具有非常重要的指导意义.
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水稻细菌性褐条病是世界性的水稻重要病害之一,在我国常见于南方稻区,发病严重时会导致水稻整株枯死,严重威胁了水稻的高产稳产.在鉴于目前国内外对该病的研究主要集中在病原鉴定、病原菌致病机理及病害防治、而对其分子生物学水平上的研究尚不深入的前提下,介绍了水稻细菌性褐条病研究的新进展,通过查阅国内外水稻细菌性褐条病研究进展的相关文献,并分析、归纳后,综述了病原菌的特性及发病机理、病害侵染循环和农业、化学、生物方面的防治措施等,以期更好地为农业防治褐条病提供参考.
为了连续测定乙酰辅酶A合成酶(acetyl-CoA synthetase,ACS)催化的乙酰辅酶A(acetyl coenzyme A,Ac-CoA)合成,探讨以醛醇脱氢酶(aldehyde/alcohol dehydrogenase,AdhE)为偶联酶检测ACS活性的可行性.以大肠杆菌(Escherichia coli K12)基因组为模板扩增、克隆AdhE基因,通过原核表达、纯化获得AdhE,对其进行了酶学动力学分析,并进一步以AdhE为偶联酶对ACS活性进行了测定.结果发现:AdhE的kcat为13
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