【摘 要】
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目的:构建人类8型疱疹病毒(HHV-8)小衣壳蛋白(ORF65)基因重组原核表达质粒并诱导表达,获得其重组融合蛋白。方法:软件设计引物,在引物两端添加特异性酶切位点,以pGEM-Teasy/ORF65为
【机 构】
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新疆医科大学第一附属医院临检中心,新疆医科大学第三附属医院检验科,新疆医科大学黄河路中医院戒毒中心,新疆医科大学第一附属医院中心实验室,新疆医科大学感染性疾病科,美国芝加哥大学伊利诺医学院免疫与微生物
【基金项目】
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新疆维吾尔自治区自然科学基金资助项目(200421122)
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目的:构建人类8型疱疹病毒(HHV-8)小衣壳蛋白(ORF65)基因重组原核表达质粒并诱导表达,获得其重组融合蛋白。方法:软件设计引物,在引物两端添加特异性酶切位点,以pGEM-Teasy/ORF65为模板,PCR扩增基因序列,克隆入原核表达载体pET-41a中,构建原核表达质粒pET41a-ORF65,转化大肠杆菌(E.coli)DH5x,经酶切、测序鉴定其插入序列的正确性,转入E.coli BL21(DE3),并诱导表达,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)方法以及序列分析软件DNAMAN 5.
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