卵泡抑素样蛋白1在维持结肠癌细胞生长和凋亡中的作用

• 作 者: 骆锴冉 刘岸
• 机 构: 绍兴文理学院附属医院普外科 312000,湖南理工学院化学化工学院，岳阳 414000
• 出 处: 中华实验外科杂志
• 发表日期: 2019年36期
• 关键词: 结肠癌发生 卵泡抑素样蛋白1 细胞死亡

目的

观察卵泡抑素样蛋白1(FSTL1)在结肠癌细胞生长和凋亡中的作用。

方法

将FSTL1小干扰RNA(siRNA)瞬时转染体外结肠癌DLD1细胞后，细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞活力；克隆形成实验观察单个DLD1细胞形成细胞克隆的能力；流式细胞术检测细胞周期和凋亡；蛋白质印迹法(Western blot)试验检测细胞周期相关蛋白(Cyclin E、E2F-1、p-Rb、p53和p73)、细胞凋亡相关蛋白[Cytochrome C、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3和聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)]和细胞通路蛋白[磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)和κB抑制蛋白(IκB)]的表达。

结果

空白对照(BC)组、siRNA阴性对照(NC)组和FSTL1 siRNA组细胞吸光度A值分别为1.124±0.157、1.243±0.161和0.708±0.114，组间差异有统计学意义(F＝11.172，P<0.01)；DLD1细胞经转染FSTL1 siRNA后，细胞克隆形成数目为(42.3±6.5)，与BC组(154.7±16.2)或siRNA NC组(183.8 ±12.6)比较，差异有统计学意义(F＝24.694，P<0.001)；BC组和siRNA NC组DLD1细胞凋亡率分别为(1.62±0.24)%和(1.84±0.27)%，与FSTL1 siRNA组(12.32 1.96)%比较，差异有统计学意义(F＝19.687，P<0.001)；沉默FSTL1的表达后可下调Cyclin E、E2F-1和p-Rb的表达，上调p53和p73的表达(F＝5.214、21.953、10.842、22.264、18.062，P<0.05)；干扰FSTL1的表达后可促进细胞中Cytochrome C、bax、cleaved-PARP和cleaved-Caspase 3的表达，并抑制bcl-2的表达(F＝18.694、31.481、28.043、34.875、39.746，P<0.01)；敲除FSTL1的表达后可导致DLD1细胞中p-ERK1/2和p-Akt表达下调(F＝35.184、15.274，P<0.01)。

结论

FSTL1与结肠癌细胞生长和凋亡密切相关。