IL-35对重度子痫前期孕妇血清诱导的脐静脉内皮细胞凋亡的作用

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目的

探讨白细胞介素35(IL-35)对子痫前期(PE)孕妇外周血血清诱导的脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡的作用。

方法

收集2016年9月至2018年3月在江苏省滨海县人民医院确诊的重度PE孕妇22例(重度PE组)、轻度PE孕妇24例(轻度PE组),同期24例正常孕妇为对照组,检测3组孕妇的外周血中IL-35水平及诱导型调节性T淋巴细胞35(iTr35)细胞的比例。并于体外分离培养正常孕妇分娩的健康新生儿脐带的HUVEC。(1)分为空白对照组、重度PE血清组和IL-35+重度PE血清组,流式细胞仪检测3组HUVEC的凋亡率;(2)分为空白对照组、肿瘤坏死因子α(TNF-α)组和IL-35+TNF-α组,基因芯片法检测3组HUVEC基因的表达水平;(3)分为空白对照组、TNF-α组、TNF-α+IL-35组、TNF-α+IL-35+shRNA组和TNF-α+IL-35+对照RNA组,实时荧光定量PCR技术和蛋白印迹法检测5组HUVEC中表达水平差异最大的基因;(4)分为空白对照组、重度PE血清组、IL-35+重度PE血清组、IL-35+重度PE血清+shRNA组和IL-35+重度PE血清+对照RNA组,采用2′,7′-二氯荧光黄双乙酸盐法和荧光亲脂性羰花青染料法检测5组HUVEC中活性氧簇水平和线粒体膜电位水平。

结果

(1)重度PE组[1.56 μg/L(0.40~2.01 μg/L)]和轻度PE组[2.83 μg/L(1.85~4.11 μg/L)]孕妇的外周血IL-35水平与对照组孕妇比较[4.14 μg/L(2.14~6.93 μg/L)],差异有统计学意义(P<0.05)。重度PE组[0.82%(0.43%~1.54%)]和轻度PE组[1.23%(0.46%~2.03%)]孕妇的外周血iTr35细胞的比例与对照组[1.64%(0.88%~2.43%)]孕妇比较,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)体外培养HUVEC,与空白对照组及TNF-α组细胞比较,IL-35+TNF-α组细胞上调倍数最大的基因是S100A8;与空白对照组[6.01%(3.46%~9.54%)]细胞比较,重度PE血清组[16.43%(6.25%~22.32%)]细胞的凋亡率显著增加,差异有统计学意义(P<0.05);与重度PE血清组比较,IL-35+重度PE血清组细胞的凋亡率[分别为16.43%(6.25%~22.32%),10.34%(5.89%~14.56%)]、活性氧簇水平(分别为133.1±2.2、50.2±3.0)均降低,线粒体膜电位水平(分别为0.21±0.11、5.12±0.24)增加,差异均有统计学意义(P均<0.05)。

结论

PE孕妇外周血IL-35水平和iTr35细胞的比例均降低,与PE孕妇血管内皮细胞损伤相关。

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